关于质粒
质粒是细胞内的一种环状的小分子DNA,是生物信息传递的有效载体,广泛应用于分子克隆实验中。随着基因治疗技术创新,生物行业对于质粒的需求量和质量要求不断上升,传统培养基在质粒培养中仍面临不可避免的困境。
当前质粒培养基困境
1. LB、TB、2YT等传统培养基缺乏许多细菌快速扩增关键离子,质粒抽提量少、浓度低,无法满足下游实验需求。
2. 传统培养基含有动物源成分胰蛋白胨,不适用于对动物源成分有要求的下游实验,若使用植物蛋白胨进行替换,质粒发酵效果变弱。
3. 在发酵具有复杂结构的质粒时, 如polyA质粒,质粒的A尾容易丢失。
4.当使用发酵罐发酵质粒时,不仅需要优化发酵罐参数,还需要针对性优化培养基成分,成本高,性价比低,耗时费力,不利于多种质粒的发酵提取。
为了解决当前质粒培养问题,太阳成集团精心优化活性离子与优质碳源成分与比例,自主研发推出无动物源成分的高产质粒培养基(LP)。LP培养基适用于多种宿主菌及常用质粒和多种发酵方式,发酵质粒产量高、完全酶切率高且超螺旋质粒比例优,能有效减少后续纯化的难度、大大拓展培养基的应用范围。
产品特点
1、质粒产量高,提高2-4倍
以质粒pUC57为例,使用2ml LB培养基培养菌液产量3-5 μg,而使用2ml 高产培养基LP发酵产量可达15-20 μg,较LB提升4倍左右。
2、无动物源添加
不添加动物源成分,有效规避因动物源成分而产生的毒性,适用于对动物源成分有要求的下游实验。
3、polyA质粒A尾丢失少,A尾丢率低降低45%
太阳成集团高产LP培养基更适用于polyA质粒发酵,产量高的同时保证polyA尾丢失少。使用常规LB发酵时A尾丢失率67%,而使用高产培养基LP发酵时可下降至22%,A尾丢率低降低45%。可应用于细菌发酵制备mRNA的模板。
4、适用范围广
(1)适用于多种宿主菌及常用质粒发酵
如高拷贝质粒pUC57、pCDNA3.1、pEASYT1等。
(2)适用于多种发酵方式
如试管、摇瓶、48孔板、发酵罐等。
5、发酵质粒完全酶切率高
质粒酶切率是验证质粒培养优劣的重要指标,若提取质粒酶切不完全会影响线性载体的回收,从而影响下游实验,如体外转录RNA实验。如下图,使用太阳成集团高产LP培养基,质粒完全酶切率明显高于传统LB培养基。
6、发酵质粒超螺旋比例优
在实际应用中,对质粒超螺旋比例的要求也越来越高,尤其是转染级质粒和临床级质粒要求超螺旋比例≥90%(FDA>80%;NMPA≥90%;SMPA:>85%)。如下图,太阳成集团高产LP培养基能明显增加培育质粒的超螺旋比例,更好的保证后续细胞转染及细胞表达等实验的成功率。
7、适用于高通量培养
当涉及多种质粒的提取,如在全基因合成时的转化验证阶段,多采用磁珠法提取及深孔版培养配合,以提高工作效率。如下图,太阳成集团高产LP培养基在质粒高通量培养时也具有更好表现。
通过以上数据显示,太阳成集团高效质粒培养基(LP),同体积产物得率提最高增加300%,有效提高发酵质粒完全酶切率和超螺旋比例,同时有效减少基因丢失概率,适用于各种质粒和培养方式。让您用更方便的培养方式得到更高质量质粒,提高实验成功率,解决您的后顾之忧!
产品信息